Одна з особливостей вірусу грипу полягає в тому, що при послідовних пасажах на курячих ембріонах або клітинних культурах при високій множинності зараження продукується знижене кількість інфекційного вірусу при збереженні високого титру гемаглютинації. Цей вірус з низькою інерційністю і високою гемагглютинирующей активністю називається неповним, або вірусом фон-Магнуса (von Magnus, 1954). Duesberg (1968) за допомогою методу ПААГЕ виявив, що неповний вірус має…

У попередніх розділах ми описали різні методи, які були використані для виділення і аналізу віріонної РНК. За винятком однієї роботи Li і Seto (1970), які стверджували, що РНК, ізольована з вірусних частинок, може бути отримана у вигляді окремої полімерної молекули, видною в електронному мікроскопі, всі дані, описані численними авторами, вказують на те, що вірусна РНК фрагментована . Як було зазначено…

Існує кілька різних методів очистки вірусів грипу. Описаний тут метод постійно використовується в нашій лабораторії, а також, з невеликими модифікаціями, в деяких інших наукових групах. Метод однаково придатний для очистки вірусу, культивованого як на курячих ембріонах, так, і на монослойной культурі фібробластів курячого ембріона (CEF). Крім того, за допомогою цього методу отримують препарати вірусу високого ступеня чистоти з 40% виходом…

Gottschalk (1957), Blix і співавт. (1957) встановили, що фермент, що входить до складу віріонів грипу, гидролизует гликозидную зв’язок, що сполучає кетогруппу N-ацетілнейр-аминовой кислоти (NANA) з Ь-галактозою, D-галактози-ном або, можливо, з іншими цукрами. За ферментом затвердилася назва «нейрамінідаза» – NA (Gottschalk, 1957). Крім того, для позначення ферменту часто вживається термін «сіалідаза». Ці назви є віддзеркаленням того, що фермент відщеплює речовину, яку…

Як було зазначено, гемагглютинация мається тільки при наявності мультівалентних молекул, які можуть бути сформовані in vitro в там разі, якщо НА2-частина субодиниці інтактна.Поскольку вони формуються з різного числа «шипів» НА *, агрегати неоднакові за розмірами. Описана модель заснована на експериментальних даних, отриманих для (великого числа вірусних штамів, проте не всі деталі схеми здійснюються для кожного окремого штаму. наприклад, спостерігаються великі…

Ізольовані субодиниці НА з молекулярною масою 80 000 не володіють гематглютіяірующей активністю. Найменшою за розмірами активної молекулою є оліго-заходів, сформований або субодиницями НА, або продуктами їх розщеплення-HAi і НА2. Цей моновалентний НА * 1 був вперше ізольований з віріона за допомогою SDS (Laver, 1964; Laver, Valentine, 1969). Він адсорбувався на еритроцитах, але не викликав аглютинації. Гемаглютинін в присутності SDS мав…

Як було зазначено вище, активний гемаглютинін включає більше однієї субодиниці НА. Це спостереження спільно з тим експериментальним фактом, що для деяких вірусних штамів у складі [гемаглютиніну виявляється кілька різних антигенних центрів, важливий для з’ясування питання про те, чи містить індивідуальний вірусний штам субодиниці НА з істотно різними послідовностями амінокислот. Це питання має особливе значення для вірусу грипу у зв’язку з…

Розщеплення тріпсінчувствятельвой зв’язку (або зв’язків) призводить до утворення двох гликопептидов, HAi і НА2, пов’язаних один з одним за допомогою дисульфідних містків. Грунтуючись на змісті цистеїну в глікопептидами НА2, можна зробити висновок, що не більше чотирьох дисульфідних зв’язків з’єднують її з глікопептидами HAi1. Відновлюючі агенти поділяють ці розщеплені субодиниці на два лоліпептіда – НАi і НА2. Поліпептид HAi містить основну частину…

Оскільки (гликопептид HAi гемаглютиніну орієнтований так, що знаходиться у водній фазі, навколишнього вирион, можна очікувати, що саме він повинен містити область (або області), яка взаємодіє з еритроцитами, клітинами-господарями, розчинними інгібіторами і антитілами. Інформація про цьому в даний час ще недостатня. Однак із штаму PR8 (НТШ) був ізольований гемагглютінінсвязивающій антиген (НАВА), ймовірно, що представляє собою димер глікопептидами HAi (Eckert, 1966, 1969,…

Протеолітичні розщеплення субодиниці НА корисно для вірусологів (навіть якщо цей процес виявиться не таким істотним для самого вірусу), оскільки воно дозволяє нам аналізувати дві частини молекули роздільно і описувати функції кожної з цих частин. Глікопептиди НА, я НА2 зі штамів АТ / Bel H0N1 і B / Lee, культивованих на курячих ембріонах, були розділені за допомогою ультрацентрифугирования в градієнті сахарози;…