Вирус гриппа

Физические и химические свойства РНК вируса гриппа. РНК, изолированная из неполного(фон-магнусовского) вируса

Одна из особенностей вируса гриппа состоит в том, что при последовательных пассажах на куриных эмбрионах или клеточных культурах при высокой множественности заражения продуцируется сниженное количество инфекционного вируса при сохранении высокого титра гемагглютинации. Этот вирус с низкой инерционностью и высокой гемагглютинирующей активностью называется неполным, или вирусом фон-Магнуса (von Magnus, 1954). Duesberg (1968) с помощью метода ПААГЭ обнаружил, что неполный вирус имеет…

Подробнее

Физические и химические свойства РНК вируса гриппа. РНК инфекционного вируса

В предыдущих разделах мы описали различные методы, которые были использованы для выделения и анализа вирионной РНК. За исключением одной работы Li и Seto (1970), утверждавших, что РНК, изолированная из вирусных частиц, может быть получена в виде отдельной полимерной молекулы, видной в электронном микроскопе, все данные, описанные многочисленными авторами, указывают на то, что вирусная РНК фрагментирована. Как было указано выше, существует…

Подробнее

Культивирование и очистка вирусов гриппа

Существует несколько различных методов очистки вирусов гриппа. Описанный здесь метод постоянно используется в нашей лаборатории, а также, с небольшими модификациями, в некоторых других научных группах. Метод одинаково пригоден для очистки вируса, культивированного как на куриных эмбрионах, так ,и на монослойной культуре фибробластов куриного эмбриона (CEF). Кроме того, с помощью этого метода получают препараты вируса высокой степени чистоты с 40% выходом…

Подробнее

Специфичность нейраминидазы вируса гриппа

Gottschalk (1957), Blix и соавт. (1957) установили, что фермент, входящий в состав вирионов гриппа, гидролизует гликозидную связь, соединяющую кетогруппу N-ацетилнейр-аминовой кислоты (NANA) с Ь-галактозой, D-галактозами-ном или, возможно, с другими сахарами. За ферментом утвердилось название «нейраминидаза» — NA (Gottschalk, 1957). Кроме того, для обозначения фермента часто употребляется термин «сиалидаза». Эти названия являются отражением того, что фермент отщепляет вещество, которое называют либо…

Подробнее

Структура «шипов» гемагглютинина вируса гриппа. Агрегация и диссоциация моновалентного гемагглютинина вируса гриппа

Как было указано, гемагглютинация имеется только при наличии мультивалентных молекул, которые могут быть сформированы in vitro в там случае, если НА2-часть субъединицы интактна. Поскольку они формируются из различного числа «шипов» НА*, агрегаты неодинаковы по размерам. Описанная модель основана на экспериментальных данных, полученных для (большого числа вирусных штаммов, однако не все детали схемы осуществляются для каждого отдельного штамма. Например, наблюдаются большие…

Подробнее

Структура «шипов» гемагглютинина вируса гриппа. Моновалентный гемагглютинин вируса гриппа

Изолированные субъединицы НА с молекулярной массой 80 000 не обладают гематглютияирующей активностью. Наименьшей по размерам активной молекулой является олиго-мер, сформированный либо субъединицами НА, либо продуктами их расщепления—HAi и НА2. Этот моновалентный НА*1 был впервые изолирован из вириона с помощью SDS (Laver, 1964; Laver, Valentine, 1969). Он адсорбировался на эритроцитах, но не вызывал агглютинации. Гемагглютинин в присутствии SDS имел коэффициент седиментации,…

Подробнее

Антигенная гомогенность субъединиц НА вируса гриппа

Как было указано выше, активный гемагглютинин включает более одной субъединицы НА. Это наблюдение совместно с тем экспериментальным фактом, что для некоторых вирусных штаммов в составе [гемагглютинина обнаруживается несколько различных антигенных центров, важен для выяснения вопроса о том, содержит ли индивидуальный вирусный штамм субъединицы НА с существенно различными последовательностями аминокислот. Этот вопрос имеет особое значение для вируса гриппа в связи с…

Подробнее

Структура субъединицы НА вируса гриппа

Расщепление трипсинчувствятельвой связи (или связей) приводит к образованию двух гликопептидов, HAi и НА2, связанных друг с другом с помощью дисульфидных мостиков. Основываясь на содержании цистеина в гликопептидах НА2, можно заключить, что не более четырех дисульфидных связей соединяют ее с гликопептидом HAi1. Восстанавливающие агенты разделяют эти расщепленные субъединицы на два лолипептида — НАi и НА2. Полипептид HAi содержит основную часть углеводной…

Подробнее

Антигенные свойства гликопептида HAi вируса гриппа

Поскольку (гликопептид HAi гемагглютинина ориентирован так, что находится в водной фазе, окружающей вирион, можно ожидать, что именно он должен содержать область (или области), которая взаимодействует с эритроцитами, клетками-хозяевами, растворимыми ингибиторами и антителами. Информация об этом в настоящее время еще недостаточна. Однако из штамма PR8 (НОШ) был изолирован гемагглютининсвязывающий антиген (НАВА), вероятно, представляющий собой димер гликопептида HAi (Eckert, 1966, 1969, 1973)….

Подробнее

Химический состав изолированных гликопептидов вируса гриппа

Протеолитическое расщепление субъединицы НА полезно для вирусологов (даже если этот процесс окажется не столь существенным для самого вируса), поскольку оно позволяет нам анализировать две части молекулы раздельно и описывать функции каждой из этих частей. Гликопептиды НА, я НА2 из штаммов АО/Bel H0N1 и B/Lee, культивированных на куриных эмбрионах, были разделены с помощью ультрацентрифугирования в градиенте сахарозы; содержащем гуа-видиншдрохлорид и дитиотриэтол…

Подробнее