Фізичні та хімічні властивості РНК вірусу грипу. РНК інфекційного вірусу

RNK gripp

У попередніх розділах ми описали різні методи, які були використані для виділення і аналізу віріонної РНК. За винятком однієї роботи Li і Seto (1970), які стверджували, що РНК, ізольована з вірусних частинок, може бути отримана у вигляді окремої полімерної молекули, видною в електронному мікроскопі, всі дані, описані численними авторами, вказують на те, що вірусна РНК фрагментована . Як було зазначено вище, існує декілька думок про точне число фрагментів РНК, що входять до складу однієї вірусної частки. Ця обставина не дозволяє визначити відносну молекулярну масу вірусного генома з якою-небудь ступенем визначеності.

Duesberg і Robinson (1967) визначили нуклеотідний склад вРНК, ізольованої з штаму PR8: урацила 33%, цитозину 24%, аденіну 23% і гуаніну 19,5%. “Раніше Ada і Perry (1956) виявили, що нуклеотідний склад вРНК, хоча і слабо, але безумовно варіює від штаму до штаму. нуклеотидний склад вРНК, а також її чутливість до РНК-азе вказують на те, що вона однонитчатим. Оскільки не спостерігається еамогабрідізаціі між молекулами РНК, ізольованими з віріонов, онРНК в складі різних віріонів представлена ланцюжками однієї полярності. (Scholtissek, Becht, 1971; Pons, 1971).

Важливим властивістю РНК вірусу грипу є її фрагментарність. Ймовірно, велике число біологічних властивостей вірусу, які відрізняють його від більшості інших вірусів тварин, можуть бути пояснені на підставі цього факту. Хоча деякі віруси рослин, мабуть, мають фрагментарний геном, в даний час показано, що, .Крім вірусу грипу, фрагментовану РНК містять тільки рео- і онкорнавіруси. В даний час фрагментарність генома вірусів грипу підтверджена фізичними, хімічними і біологічними методами.

Седиментаційних аналіз міченої РНК, екстрагованої з очищених вірусних частинок, привів багатьох дослідників до незалежного висновку про те, що ця РНК має відносну молекулярну масу, занадто малу для кодування інформації, необхідної для синтезу вірус-специфічних поліпептидів (Davis, Barry, 1966 ; Duesberg, Robinson, 1967; Nayak, 1969; Pons, 1967a). У двох останніх роботах була описана ізоляція РНК з високою молекулярною масою (Agrawal, Bruening, 1966), однак, як зараз ясно, отримані результати, ймовірно, пов’язані з агрегацією фрагментів РНК або з наявністю неповністю депротеінізований молекул РНП. Аналіз вРНК, проведений Duesberg (1968), Pons і Hirst (1968а) за допомогою ПААГЕ, показав, що геном вірусу являє собою суму принаймні п’яти фрагментів РНК. Пізніше було виявлено, що вірусспеціфіческой донРНК, екстраговані з інфікованих клітин, також представляють собою суміш фрагментів, які після поділу на онРНК при плавленні мали ті ж електрофоретічесше рухливості, що і РНК, виділені з віріонів (Pons, Hirst, 1968). Ці факти підтвердили точку зору, що наявність фрагментів має біологічне значення і не пов’язано з простими деградаційних процесів під час виділення РНК.

Наведені біохімічні експерименти показали, що вірусний геном фрагментарен. Існує також кілька біологічних фактів на користь цього висновку. Висока частота рекомбінацій, отримана при генетичних скрещиваниях вірусів грипу, вказує на наявність механізму, схожого з випадковою пересортовування сегментів, а не на процес класичної генетичної рекомбінації з кросинговері між окремими видами РНК (Simpson, Hirst, 1961; Hirst, 1962). Scholtissek і Rott (1969) виявили, що байєр-139 (Вауег-139) інактивує властивості вірусу ступінчастим чином. Це вказує на наявність у вірусу мультикомпонентного гнома. Досліди по множинної реактивації (Hend, Liu, 1951; Barry, 1961) і ультрафіолетової інактивації (Joss et al., 1969; Gandi, Burke, 1970) були також інтерпретовані як можливий доказ існування мультикомпонентного генома.

Хоча дані біохімічних і .біологіческіх досліджень наводили на думку про існування фрагментарного генома, найбільш доказовими експериментами на користь цього припущення були наступні: Young і Content (1971) розділили за допомогою швидкісної седиментації в РНК на фрагменти трьох розмірів. Кожен з трьох класів фрагментів мав власним 5 ‘кінцем виду рррАр. Lewandowski і співавт. (1971) показали, що на -кінці знаходиться нефосфорілірованний уридин (У-ОН). ‘Крім того, Content і Duesberg (1971) виявили різницю в послідовності підстав у трьох різних за розмірами класів вРНК, a Horst і співавт. (1972) показали наявність різних олигонуклеотидов в кожному з названих фрагментів РНК. Ці дані, при обліку описаних раніше, дозволяють зробити висновок, що вкрай малоймовірно, або навіть неможливо, виникнення фрагментів РНК за рахунок розщеплення однієї ко-валентно безперервної однонитчатим молекули РНК.

Таким чином, ясно, що геном вірусу грипу фрагментований. Однак немає жодних доказів на користь того, що має місце зв’язок між окремими фрагментами, така, наприклад, як перекривання комплементарних (кінців. Оскільки віруоспеціфіческая РНК, -ізолірованная з інфікованих клітин, також фрагментована, не зовсім ясно, яким чином при дозріванні вірусу до його складу включається потрібне число потрібних фрагментів РНК. Це питання буде обговорено в розділі V цієї глави.

Джерело: Віруси грипу та грип, під ред. Кільбурн Е.Д – М.Медицина, 1978р.

Список використаної літератури:

Інструкція до застосування медичного препарату НАЗОФЕРОН; 2) «Аллергология и иммунлогия: национальное руководство» под. ред.. Р.М. Хаитова, Н.И. Ильиной – М.: ГЭОТАР-Медиа. 2009 г.; 3) Г.М. Драннік. Клінічна імунологія та алергологія. – Київ. «Здоров’я», 2006 р. 4) Наказ МОЗ України від 16.09.2011 № 595 «Про порядок проведення профілактичних щеплень в Україні та контроль якості й обігу медичних імунобіологічних препаратів»; 5) Г.В. Бекетова «Інтерферони в лікуванні гострих респіраторних інфекцій у дітей», журнал «Ліки України» № 3, (149), 2011 р.; 6) Шехтман М.М., Положенкова Л.А. Гострі респіраторні захворювання у вагітних / / Гінекологія. – 2005. – Т. 7. – № 2. – С. 34-37; 7)Приступа, Л.Н. Грип та гострі респіраторні вірусні інфекції у вагітних: Особливості Лікування та профілактики / / Медичні аспекти здоров’я жінки. – 2008. – № 5 (14). – С. 14-19; 8) Тарбаева Д.А., Костинов М.П., Загородня Е.Д., Іозефсон С.А., Черданцев А.П.Акушерскі і перинатальні наслідки вагітності, ускладненої гострою респіраторною інфекцією в II триместрі гестації / / Журнал “Акушерство і гінекологія.” – 2012. – № 2; 9) С.О.Крамарєв, д.м.н., професор В.В. Євтушенко «Оцінка ефективності рекомбінантного інтерферону альфа для лікування та профілактики гострих респіратоних вірусних інфекцій у дітей», журнал «Здоров’я України», № 18/1, 2008 р.; 10) А.А.Ярилин. Імунологія. Підручник. Москва. «Геогар-медіа». 2010 р.; 11) О.М. Біловол, П.г. Кравчун, В.Д. Бабаджан. «Клінічна імунологія та алергологія». Навчальний посібник медичних ВНЗ IV рівня акредитації та медичних факультетів університетів. Харків. «Гриф», 2011 р.; 12) С.О. Крамарєв, О.В. Виговська, О.Й. Гриневич «Обгрунтування застосування препаратів інтерферону при гострих респіраторних інфекціях у дітей», журнал «Клінічна імунологія. Алергологія. Інфектологія. 2007. № 10.»; 13) Є.І. Юліш, д.м.н. професор О.Є. Чернишева, Ю.А. Сорока «Інтерферонотерапія при ГРВІ і дітей», журнал «Здоров’я України» № 1(16), березень 2011 р.; 14С.П. Кривопустов «Інтаназальне використання інтраназального інтерферону альфа в педіатрії», журнал «Здоров’я України № 1, квітень 2010 р.»; 14) Лікування гострих респіраторних вірусних інфекцій у дітей, які часто хворіють: прості відповіді на складні запитання. Л.В. Беш, О.І. Мацюра, Львівський національний медичний університет ім. Данила Галицького, Львівський міський дитячий алергологічний центр. 2012 р.; 15) Діти, які часто хворіють: дискусійні питання і можливості їх вирішення. Л.В. Беш, Львівський національний медичний університет ім. Данила Галицького, Львівський міський дитячий алергологічний центр. 2011 р.; 16) Назоферон – на варті здоров’я у дітей. А.П. Волосовець. 2010 р.; 17) Наказ МОЗ України від 07.11.2009 № 814 "Про затвердження Клінічного протоколу діагностики та лікування у дітей пандемічного грипу, спричиненого вірусом (А H1/N1 Каліфорнія)"; 18) Наказ МОЗ України від 13.11.2009 № 832 "Про внесення змін до наказу МОЗ від 20.05.2009 №189-Адм „Про затвердження „Протоколу діагностики та лікування нового грипу А H1/N1 Каліфорнія) у дорослих"; 19) Наказ МОЗ України від 09.07.2004 № 354 Про затвердження Протоколів діагностики та лікування інфекційних хвороб у дітей; 20) Наказ МОЗ України від 21.04.2005 № 181 Про затвердження Протоколів надання медичної допомоги дітям за спеціальністю "дитяча отоларингологія"; 21) Наказ МОЗ України від 03.07.2006 № 433 Про затвердження протоколів надання медичної допомоги за спеціальністю „Пульмонологія"; 22) Наказ МОЗ України від 13.01.2005 № 18 Про затвердження Протоколів надання медичної допомоги дітям за спеціальністю "дитяча пульмонологія"; 23) Наказ МОЗ України від 09.07.2004 № 355 Про затвердження Протоколів лікування дітей за спеціальністю "Дитяча імунологія"; 24) Грип у дітей. О. К. Александрова. Посібник для лікарів та учнів медичних ВУЗІВ. Краснодар 2008; 25) ЗАГАЛЬНА БІОЛОГІЯ І МІКРОБІОЛОГІЯ ОСНОВИ ВІРУСОЛОГІЇ ОСОБЛИВОСТІ РЕПРОДУКЦІЇ ВІРУСІВ. Навчальний посібник для модульно-рейтингової технології навчання. С.В. Лаптєв, Н.І. Мезенцева. Бійськ 2005.; 26) Особливості харчування вагітних і жінок у період лактації. Н.А. Коровіна, Н.М. Подзолкова, І.М. Захарова. Москва 2008; 27) «Тиждень за тижнем». Сучасний довідник для майбутніх мам. Бердникова О.В. Москва 2007; 28) МЕДСЕСТРИНСТВО ПРИ ІНФЕКЦІЙНИХ ХВОРОБАХ. М.А. Андрейчин. О.Л. Івахів. Тернопіль, «Укрмедкнига», 2002 р.; 29) Вакцинація дитини. Краще запобігти, ніж захворіти. Інформація для батьків ©UNICEF/UKRAINE/2010/G.Pirozzi; 30) МЕДСЕСТРИНСТВО В ТЕРАПІЇ. За загальною редакцією проф. М.І. Шведа та проф. Н.В. Пасєчко. Тернопіль..